机械不机械姬 发表于 2026-1-30 10:56:55

ECC选择性显色培养基实验原理

       原理
  HiCrome ECC显色培养基使用了HiVeg特别蛋白胨替代动物源特别蛋白胨,使得培养基无BSE/TSE风险。该培养基为鉴别培养基,用于初步鉴定来自食品和环境样品的大肠杆菌和其他大肠菌群(3)。
  培养基含两种显色原。一种被大肠埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,产生蓝色至紫色菌落,另一种被大肠菌群的半乳糖苷酶裂解,产生玫瑰红-粉色菌落(1,2)。HiVeg特别蛋白胨和酵母粉提供氮源物质、和其他必要生长营养素。乳糖提供可发酵的碳水化合物,中性红为pH指示剂。和磷酸/二氢钾为培养基的缓冲液。氯化钠有助于维持渗透压平衡。
  使用前使培养基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(货号MV028)进行1:5或1:10稀释食品样品并进行样品匀浆。将匀浆液0.5ml或1ml用无菌玻璃涂布棒涂布在琼脂表面并在35-37°C孵育18-24小时。孵育结束后对蓝/紫菌落进行计数,并乘以稀释因子。大肠埃希菌的数目以每g食品为单位报告。
  培养基组成
  成分
  克/升
  HiVeg特殊蛋白胨
  5.00
  酵母粉
  3.30
  乳糖
  2.50
  
  3.50
  磷酸/二氢钾
  1.50
  氯化钠
  5.00
  显色混合剂
  20.30
  中性红
  0.03
  琼脂
  15.00
  最终 pH (25°C) 6.8±0.2
  配制
  55.83克溶于1000 ml蒸馏水。轻轻加热使培养基溶解。15磅(121℃)高压灭菌15分钟。冷却至50℃。混匀并倾注无菌平皿。培养基可能不透明,不过不影响其性能。
  质量控制
  粉末外观:淡粉色均一自由流动粉末。
  成胶性:结实,相当于1.5%琼脂糖凝胶。
  制备好的培养基的颜色和透明度:平皿内为粉红色不透明凝胶。
  配比后的pH值:5.58%水溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自动为6.8 ± 0.2(25°C)。
  培养反应
  35-37°C培养18-24小时后,观察培养反应
  有机体
  生长
  菌落颜色
  大肠杆菌(ATCC 25922)
  旺盛
  蓝/紫
  肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)
  旺盛
  玫瑰红/粉红
  铜绿假单胞菌(ATCC 27853)
  好-旺盛
  稻草色
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