影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些
影响ELISA试剂盒曲线问题的原因有哪些 标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题,随后,技术人员将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结: 一 OD值不正常的可能原因是: 1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃; 2、温度控制不好,控制正确温度; 3、孵育时间不准确,控制孵育时间; 4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干; 5、阳光直射,对着风直接吹,避风避; 6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm; 7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体; 8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。 二 白板的可能原因是: 1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液; 2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。 三 无梯度可能原因是: 1、标准品也污染,换标准品点板; 2、OD值不正常,控制温度时间在做一次; 3、人为点板,不要点板。 四 线性不好可能原因是:OD值不正常,控制温度时间在做一次。 谢谢分享,非常有价值
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