羊藿苷对人卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭的影响
羊藿苷对人卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭的影响何泉
南昌大学
摘要：目的:通过不同浓度羊藿苷(Icariin,ICA)作用于人卵巢癌SKOV3细胞,观察其对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及转移的影响,初步探索羊藿苷抗卵巢癌的分子机制。方法:1.将细胞分成五组:0μg/mL ICA,25μg/mL ICA,50μg/mL ICA,100μg/mL ICA,200μg/mL ICA;2.采用MTT测定ICA对各组SKOV3细胞增殖的影响;3.采用划痕实验检测ICA对SKOV3细胞体外迁移能力的影响;4.采用Transwell小室观察ICA对SKOV3细胞侵袭能力的影响;5.采用ELISA法检测ICA对SKOV3细胞上清液MMP-2和MMP-9蛋白分泌量的影响;6.采用RT-PCR检测ICA对SKOV3细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达的影响。结果:1.MTT检测结果显示,ICA干预SKOV3细胞后生长明显受抑制,各实验组与对照组相比,均有显著性差异,P<0.05。在100μg/mL浓度范围内,随着浓度增加,药物抑制细胞增殖的能力逐渐加强,呈剂量依赖性,P<0.05,表明ICA可抑制SKOV3细胞的增殖。2.划痕实验结果显示,ICA干预组(25μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)与对照组相比,细胞愈合的面积明显减少,P<0.05,差异有统计学意义,并且随着药物浓度增加,愈合的面积逐渐减少,呈剂量依赖性,P<0.05,表明ICA可抑制SKOV3细胞的迁移能力。3.Transwell小室检测发现,经ICA处理后的各实验组(25μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)细胞与对照组相比,由上室侵袭进入下室的细胞数量明显减少,P<0.05,差异有统计学意义,同时随着药物浓度增加,进入下室的细胞逐渐减少,呈剂量依赖性,P<0.05,表明ICA能够抑制SKOV3细胞的侵袭能力。4.ELISA法检测结果提示在不同浓度(25μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)的ICA作用下,各实验组SKOV3细胞上清液中MMP-2和MMP-9含量均有不同程度的下降,与对照组相比,P<0.05,差异有统计学意义,随着药物浓度的增加,蛋白含量持续下降,呈剂量依赖性,P<0.05。5.RT-PCR检测发现,在不同浓度(25μg/mL,50μg/mL,100μg/mL)的ICA干预下,各实验组SKOV3细胞的MMP-2和MMP-9 mRNA基因表达水平被不同程度下调,与对照组相比,P<0.05,差异有统计学意义,随着药物浓度逐渐增加,mRNA表达水平逐步下降,呈剂量依赖性,P<0.05。结论:ICA对SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭有显著的抑制作用,并呈剂量依赖性,其机制可能与选择性抑制SKOV3细胞分泌MMP-2和MMP-9的活性有关。 还原
关键词：羊藿苷; 卵巢癌; MMP-2; MMP-9; 增殖; 迁移; 侵袭;
导师：何林生;
分类号：R285
文内图片：
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划痕实验结果图（×100）
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Transwell小室实验结果图（×100）
MMP-2和MMP-9mRNA电泳结果 值得学习
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