液相色谱仪流动相使用的注意事项
液相色谱仪流动相使用的注意事项必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并要先经0.45μm薄膜过滤。 过滤后的流动相必须经过充分脱气,以除去其中溶解的气体(如O2),如不脱气易产生气泡,增加基线噪声,造成灵敏度下降,甚至无法分析。
几中脱气方法比较: 1. 氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。 2. 加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染。 3. 抽真空脱气法:易抽走有机相 4. 超声脱气法:一种较为常见的脱气法。流动相放在超声波容器中,用超声波震荡10~15分钟,此法效果并不是太好,但操作简单。 如果管路中使用peek树脂部件,请不要使用下列流动相: 浓硫酸、浓硝酸、二、丙酮、、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜
特别注意: 含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法: 1.先用10︰90的甲醇/水冲洗,以洗去缓冲盐,清洗时间至少为一小时。 2.再用90︰10的甲醇/水,冲洗系统,并将系统保存在该流动相中。清洗时间至少为40分钟。
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